如何挑選大鼠ELISA試劑盒，這些方法不能錯過！

　　ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。其中大鼠ELISA試劑盒適以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

　　

　　市場上各種廠家、各種種屬、因子，質量良莠不齊，如何慧眼識珠，選擇既符合研究需求，又能挑選合適的ELISA試劑盒？

　　

　　1、查找待測樣本的蛋白濃度

　　

　　可以通過NCBI的文獻，給出的蛋白表達量參考值來比較大鼠ELISA試劑盒給出的樣本值與報道值是否一致。

　　

　　2、試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類

　　

　　除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細胞上清，和細胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。

　　

　　3、檢測范圍：

　　

　?。?）建立線性范圍：需測定9-11個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。

　　

　?。?）驗證標稱線性參數：需測定4-6個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。

　　

　?。?）所有樣本應在一次運行中或幾次間隔很短的運行中隨機測定，在一天之內完成。

　　

　　4、大鼠ELISA試劑盒的其它指標：

　　

　　a、靈敏度：

　　

　　示例：低可檢測濃度為0.1pg/ml（6次獨立實驗的平均值），10個零標準品濃度OD的平均值加上兩倍SD，計算低可檢測濃度。

　　

　　注意：靈敏度跟檢測范圍低點不相等。

　　

　　b、穩定性（重復性、精密性）

　　

　　酶標板內精密度3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次，評估酶標板內的精密度。酶標板間精密度3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測6次，評估酶標板間的精密度。

　　

　　試劑盒一般板內變異系數小于10%，板間變異系數小于15%（統計學概念）

　　

　　對于大鼠ELISA試劑盒來說，正確的處理樣本是保證檢測準確性和正確性的一步。正式實驗之前使用少量的樣本進行預實驗，可以選擇2、5、10倍稀釋樣本，選擇合適的稀釋比例進行實驗，這點非常重要！