人纖維蛋白ELISA試劑盒的技術流程介紹

　　人纖維蛋白ELISA試劑盒技術流程：

　　1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

　　2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

　　3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

　　5、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　檢測類型：酶聯免疫法。

　　實驗類型： 夾心法。

　　應用范圍： 血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體。

　　產品特點：重復性好，特異性強，性價比高，線性好。

　　檢測目的：人纖維蛋白ELISA試劑盒用于測定血清，血漿及相關液體等樣本，例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

　　標本的采集及保存：

　　1、血清：標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

　　2、血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內離心15分鐘，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

　　3、組織勻漿：將動物的組織標本先用PBS洗滌，去除多余血液，勻漿化后放在20 mL PBS中于-20° C放置過夜，第二天，經過二次反復凍融破膜，將勻漿物5000x g離心5分鐘，取上清即可檢測。

　　4、細胞培養物上清：請離心后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融。